"Обмен кальция и фосфора". Практическое занятие кафедры биохимии
Мы используем прямой колориметрический метод без депротеинизации (с восстановителем).
Неорганический фосфор реагирует с молибдатом аммония в сильнокислой среде (серная кислота), образуя фосфорно-молибденовый комплекс желтого цвета. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации фосфора в образце.
Оборудование и реактивы:
Молибденовокислый аммоний в .серной кислоте
Калибратор (стандартный раствор фосфора с точно известной концентрацией)
Сыворотка пациента
Фотометр/КФК, кювета 1 см.
Дозаторы, наконечники, штативы
| Реагент/Образец | Опытная проба (О) | Стандарт (Ст) | Холостая (Х) |
|---|---|---|---|
| Сыворотка | 20 | – | – |
| Калибратор | – | 20 | – |
| Дист. вода | – | – | 20 |
| Рабочий реагент | 2000 | 2000 | 2000 |
Сыворотку смешивают с трихлоруксусной кислотой (ТХУ). Белки денатурируют и выпадают в осадок.
Отделяем осадок белков от прозрачного супернатанта (центрифугата).
- К безбелковому центрифугату добавляем молибдат аммония. В кислой среде образуется фосфорно-молибденовая кислота, которую мы восстанавливаем эйконогеном / аскорбиновой кислотой до синего молибденового комплекса. Интенсивность синей окраски пропорциональна концентрации фосфора
Last modified: Monday, 1 June 2026, 9:15 PM
