"Лабораторная диагностика эндокринных нарушений-1". Практическое занятие кафедры биохимии
Проведение пробоподготовки образцов сыворотки, плазмы и/или цельной крови для последующего измерения различных аналитов на биохимическом анализаторе, цитометре, коагулометре и других приборах. Непосредственная пробоподготовка проводится согласно протоколу в зависимости от вида исследуемой биологической жидкости, прибора и исследуемых аналитов.
Пример: получение бедной тромбоцитами плазмы для последующего измерения количества специфических микровезикул
1. Цельная кровь в пробирке с нитратом (3,2%) центрифугируеся на 3500 об/мин в течение 15 минут.
2. Полученная плазма отбирается в отдельные эппендорфы, снова центрифугируется на 13500 об/мин в течение 5 минут.
3. Полученную плазму необходимо развести 1:20 раствором CellWash.
4. 50 мкл разведения помещают в отдельную пробирку для последующего добавления моноклональных антител.
5. После добавления антител пробирка инкубируется в темноте при комнатной температуре в течение 30 минут. Перед непосредственным измерением необходимо добавить 100-150 мкл CellWash.