Практическое занятие МЕТАБОЛИЗМ УГЛЕВОДОВ. РОЛЬ ФЕРМЕНТОВ В ПЕРЕВАРИВАНИИ УГЛЕВОДОВ (кафедра биохимии)
УГЛЕВОДЫ ПИЩИ: КЛАССИФИКАЦИЯ
| Класс | Примеры | Источники | Связи |
|---|---|---|---|
| Полисахариды | Крахмал (амилоза + амилопектин), гликоген | Хлеб, крупы, картофель | α-1,4- и α-1,6-гликозидные |
| Дисахариды | Сахароза, лактоза, мальтоза | Сахар, молоко, солод | α-1,2 (сахароза), β-1,4 (лактоза), α-1,4 (мальтоза) |
| Моносахариды | Глюкоза, фруктоза, галактоза | Мед, фрукты, гидролиз лактозы | — |
ФЕРМЕНТЫ ПЕРЕВАРИВАНИЯ УГЛЕВОДОВ
| Орган | Фермент | Субстрат | Продукты | Оптимум pH |
|---|---|---|---|---|
| Ротовая полость | α-Амилаза (птиалин) | Крахмал, гликоген | Декстрины, мальтоза, мальтотриоза | 6,5–7,0 |
| Желудок | (амилаза инактивируется HCl) | — | — | — |
| ДПК / Поджелудочная железа | Панкреатическая α-амилаза | Крахмал, декстрины | Мальтоза, изомальтоза, мальтотриоза | 7,1–8,0 |
| Щеточная кайма тонкой кишки | Мальтаза | Мальтоза | 2 глюкозы | ~6,0 |
| Сахараза-изомальтаза | Сахароза, изомальтоза | Глюкоза + фруктоза; 2 глюкозы | ~6,0 | |
| Лактаза (β-галактозидаза) | Лактоза | Глюкоза + галактоза | ~6,0 | |
| Глюкоамилаза | Олигосахариды | Глюкоза | ~6,0 |
Ключевой момент: Конечный продукт переваривания углеводов — моносахариды (в основном глюкоза), которые всасываются в кровь.
НАРУШЕНИЯ ПЕРЕВАРИВАНИЯ УГЛЕВОДОВ
| Дефицит фермента | Результат | Проявление |
|---|---|---|
| Лактаза | Непереносимость лактозы | Диарея, метеоризм после молока |
| Сахараза-изомальтаза | Непереносимость сахарозы | Диарея после сахара, сладостей |
| α-Амилаза (панкреатическая) | Мальабсорбция крахмала (амилорея) | Крахмал в кале (редко, компенсируется) |
ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ α-АМИЛАЗЫ (ПОЛУКОЛИЧЕСТВЕННО)
Определить титр (активность) α-амилазы в слюне методом серийных разведений.
Активность выражают максимальным разведением слюны, при котором происходит полный гидролиз крахмала за стандартное время (10–20 мин).
ХОД РАБОТЫ
Приготовить серийные разведения слюны в физиологическом растворе:
1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320, 1:640, 1:1280
В каждую пробирку внести:
1 мл разведения слюны + 1 мл 0,1% крахмала
Инкубация 15 мин при 37°C.
Добавить 2–3 капли йода.
Найти максимальное разведение, при котором отсутствует синее окрашивание (только желтый или бурый).
| Разведение | 1:10 | 1:20 | 1:40 | 1:80 | 1:160 | 1:320 | 1:640 | 1:1280 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Цвет с I₂ | желт | желт | желт | желт | бурый | синий | синий | синий |
Титр амилазы = 1:160 (при гидролизе за 15 мин).
Норма слюны: 1:160 – 1:640 в зависимости от времени инкубации.
