Практическое занятие ОБЩЕКЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ (кафедра биохимии)
Копрологическое исследование (копрограмма) — совокупность макроскопических, микроскопических и химических методов исследования кала, позволяющая оценить:
Переваривающую способность различных отделов ЖКТ
Наличие воспалительных процессов в кишечнике
Функцию поджелудочной железы, печени и желчевыводящих путей
Скрытые кровотечения
ЭТАП 1. ПРАВИЛА СБОРА МАТЕРИАЛА
Подготовка пациента (за 3-5 дней до исследования)
| Тип подготовки | Мероприятие |
|---|---|
| Диета | Назначенная врачом (диета Шмидта или Певзнера) — исключить продукты, влияющие на цвет и перистальтику |
| Отмена препаратов | Железо, висмут, слабительные, антибиотики, НПВС (за 3-4 дня) |
| Ограничения | Исключить алкоголь, красители, свеклу, томаты |
Алгоритм сбора материала
| Этап | Действие |
|---|---|
| 1 | Обеспечить пациента чистым сухим контейнером с ложечкой и направлением |
| 2 | Кал собирают после самопроизвольной дефекации (без клизм и слабительных) |
| 3 | Избегать попадания мочи и отделяемого половых органов |
| 4 | Ложечкой взять 5-10 г кала (объем ~1 десертной ложки) из 3-4 разных мест порции |
| 5 | Поместить в контейнер, плотно закрыть крышкой |
| 6 | Доставить в лабораторию в день сбора (утренние часы) |
Условия хранения и транспортировки
| Условие | Норма |
|---|---|
| Температура | +3…+5°C (холодильник) |
| Максимальное время хранения | 8-12 часов |
| Транспортная среда | При необходимости — 9% уксусная кислота (для консервации) |
Недопустимо: замораживание, длительное хранение при комнатной температуре, добавление дезинфектантов.
ЭТАП 2. МАКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
Оценка физических свойств кала
| Показатель | Норма | Патологические изменения | Клиническое значение |
|---|---|---|---|
| Консистенция | Плотная, оформленная | Жидкий/кашицеобразный | Диарея, ускоренная перистальтика |
| Твердый («овечий» кал) | Запор, спастический колит | ||
| Пенистый | Бродильная диспепсия | ||
| Лентовидный/тонкий | Стеноз, опухоль прямой кишки | ||
| Цвет | Коричневый (стеркобилин) | Черный (дегтеобразный) | Желудочно-кишечное кровотечение (мелена) |
| Светло-серый/белый | Обтурация желчных путей (ахоличный кал) | ||
| Желтый | Бродильная диспепсия, ускоренная эвакуация | ||
| Красноватый | Кровотечение из нижних отделов (геморрой, трещины) | ||
| Темно-коричневый | Гнилостная диспепсия, колит с запором | ||
| Запах | Калловый, нерезкий | Гнилостный | Гнилостная диспепсия, язвенный колит |
| Кислый | Бродильная диспепсия | ||
| Зловонный | Панкреатическая недостаточность | ||
| Слизь | Отсутствует | На поверхности или внутри | Воспаление (колит, дизентерия, СРК) |
| Кровь | Отсутствует | Прожилки, сгустки | Кровотечение из дистальных отделов |
Мелена (черный дегтеобразный стул) — характерна для кровотечений из верхних отделов ЖКТ (желудок, ДПК), где гемоглобин под действием HCl и ферментов превращается в гематин.
ЭТАП 3. ХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
3.1. Определение pH (кислотности)
| pH | Интерпретация |
|---|---|
| 6,0 – 8,0 | Норма |
| < 6,0 (кислая) | Бродильная диспепсия (избыток жирных кислот, углеводное брожение) |
| > 8,0 (щелочная) | Гнилостная диспепсия, панкреатическая недостаточность |
3.2. Реакция на скрытую кровь (проба Грегерсена)
Принцип метода:
Гемоглобин крови обладает пероксидазной активностью — катализирует окисление бензидина перекисью водорода
При положительной реакции появляется синее или зеленое окрашивание
Ход выполнения:
| Шаг | Действие |
|---|---|
| 1 | Тонкий мазок кала нанести на предметное стекло |
| 2 | Приготовить реактив ex tempore: 1% бензидин в 50% уксусной кислоте + H₂O₂ (1:1) |
| 3 | Нанести 2-3 капли реактива на мазок |
| 4 | Оценить окрашивание в течение 1-2 минут |
Оценка результата:
| Результат | Окрашивание | Клиническое значение |
|---|---|---|
| Отрицательный (-) | Отсутствует | Норма |
| Слабо положительный (+) | Слабо-зеленое | Минимальное кровотечение |
| Положительный (++) | Зеленое | Умеренное кровотечение |
| Резко положительный (+++) | Синее/темно-синее | Значительное кровотечение |
Чувствительность: проба становится положительной при кровопотере 2-5 мл .
Ложноположительные результаты: мясная диета, прием железа, НПВС, кровоточивость десен.
Подготовка к пробе Грегерсена (за 3 дня):
Исключить мясо, рыбу, печень, яйца (гемоглобин животных)
Отменить препараты железа, висмута, аскорбиновую кислоту
Исключить чистку зубов (травма десен)
3.3. Определение стеркобилина
| Показатель | Норма | Повышение | Понижение/отсутствие |
|---|---|---|---|
| Стеркобилин | Присутствует (положительная реакция) | Гемолитические желтухи | Паренхиматозные желтухи, обтурация желчных путей (ахоличный кал), дисбактериоз |
Стеркобилин — конечный продукт катаболизма гема, придающий калу коричневую окраску. При отсутствии желчи в кишечнике кал обесцвечивается (ахоличный).
3.4. Определение билирубина
| Результат | Интерпретация |
|---|---|
| Отрицательный | Норма (у взрослых) |
| Положительный | Усиленная перистальтика, дисбактериоз, у детей грудного возраста (норма) |
В норме билирубин восстанавливается кишечной микрофлорой до стеркобилина. Положительная реакция на билирубин у взрослых указывает на нарушение микробного пейзажа.
ЭТАП 4. МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
Приготовление препаратов
| Препарат | Окраска | Что выявляет |
|---|---|---|
| Нативный (физиологический раствор) | — | Мышечные волокна, клетчатка, жир, слизь, лейкоциты, эритроциты, эпителий, кристаллы, яйца гельминтов |
| С раствором Люголя | I₂ в KI (сине-фиолетовый) | Крахмал, йодофильная флора |
| С Суданом III | Оранжевый | Нейтральный жир (капли) |
| С метиленовым синим | Голубой/синий | Кристаллы жирных кислот |
4.1. Элементы животного происхождения (белковое питание)
Креаторея — наличие большого количества мышечных волокон в кале, признак недостаточности протеолитических ферментов (желудок, поджелудочная железа).
4.2. Элементы углеводного происхождения
Амилорея — наличие крахмала в кале, признак недостаточности панкреатической α-амилазы или ускоренного транзита.
4.3. Элементы жирового происхождения
| Элемент | Как выглядит | Норма | Патология (стеаторея) | Причина |
|---|---|---|---|---|
| Нейтральный жир | Капли (окрашиваются Суданом III) | Отсутствует | Много | Недостаточность панкреатической липазы |
| Жирные кислоты | Иглы, кристаллы | Незначительное количество | Много | Нарушение желчеотделения |
| Мыла (соли ЖК) | Бесцветные пластинки, комки | Умеренное количество | Много | Ускоренная перистальтика, мальабсорбция |
Стеаторея — наличие нейтрального жира в кале, характерна для панкреатической недостаточности. Жирные кислоты и мыла появляются при нарушениях всасывания и желчеотделения.
4.4. Йодофильная флора
| Элемент | Норма | Патология | Причина |
|---|---|---|---|
| Йодофильные бактерии (клостридии, кокки) | Отсутствуют или единичные | Обильно (сине-фиолетовые с I₂) | Бродильный дисбактериоз (избыток углеводов) |